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在對骨堿性磷酸酶進(jìn)行檢測的方法及注意細(xì)節(jié)介紹

更新時間:2022-06-22      點擊次數(shù):1310
  骨堿性磷酸酶全稱叫骨源性堿性磷酸酶即為NBAP.骨堿磷酸酶(NBAP)是成骨細(xì)胞的表型標(biāo)志物之一,它可直接反映成骨細(xì)胞的活性或功能狀況,是近年來主要用于小兒佝僂病早期診斷和亞臨床鑒別的特異性參考指標(biāo),也是目前用于評價人體骨礦化障礙的佳指標(biāo)。
  堿性磷酸酶與骨鈣化作用密切相關(guān),此酶的活性在胚胎期和骨骼發(fā)育期以及鈣化過程中均有一致關(guān)系。骨堿磷酸酶主要見于骨化的軟組織中,不見于無鈣化的軟骨中。此酶系成骨細(xì)胞所產(chǎn)生,當(dāng)成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)楣羌?xì)胞時,此酶活性逐漸降低。
  骨堿性磷酸酶進(jìn)行檢測的方法及注意細(xì)節(jié)如下:
  1、首先是血球和血漿的分離,這一過程是基于全血樣品經(jīng)過血漿分離器將血球截留在分離器的血球容納膜上,而血漿滲濾穿過轉(zhuǎn)運膜到達(dá)反應(yīng)膜的特定區(qū)域,血漿分離完成后,將血漿分離器從反應(yīng)裝置上取下。
  2、是本產(chǎn)品與血漿中其它組分,包括其它來源的堿性磷酸酶(ALP)分離達(dá)到特異測定骨堿磷酸酶的目的。這一目的實現(xiàn)是根據(jù)小兒型骨堿磷酸酶(N骨堿磷酸酶)和成人骨堿磷酸酶(A骨堿磷酸酶)分子結(jié)構(gòu)中糖基類型的不同,分別選擇相應(yīng)的親和素,我們可稱之為N骨堿磷酸酶-結(jié)合蛋白和A骨堿磷酸酶-結(jié)合蛋白,預(yù)先固相在反應(yīng)膜的特定區(qū)域—反應(yīng)區(qū)上。當(dāng)血漿經(jīng)過此區(qū)域滲濾時,骨堿磷酸酶即被結(jié)合,而其它組成濾過或被滴加的洗滌液清洗掉,從而完成特異性親和反應(yīng)。
  3、方可進(jìn)行骨堿性磷酸酶的活性測定顯色反應(yīng)。反應(yīng)膜固定在反應(yīng)滑板上,待親和反應(yīng)完成后,將反應(yīng)滑板推動,使反應(yīng)膜到達(dá)反應(yīng)孔正中,將顯色液滴加到反應(yīng)孔內(nèi)的反應(yīng)膜上,在37℃反應(yīng)一定時間,酶促反應(yīng)顯色的深淺與骨堿磷酸酶活性成正比,對照說明書上的標(biāo)準(zhǔn)色板目測判讀骨堿磷酸酶活性。
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